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豬組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒

Product Introduction
實驗原理檢測指標試劑盒組成操作步驟標本要求
英文名稱 Porcine CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit
中文名稱 豬組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒
貨號 EK-P41954 種屬 Porcine/豬
規格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
檢測方法 雙抗體夾心法
檢測范圍 靈敏度
中文名稱 English name 96T/48T 含量 保存
ELISA酶標板(可拆卸) Microelisa stripplate 8×12 / 8×6 * 2-8℃
標準品 Standard 1瓶 0.5ml * 2-8℃
標準品稀釋液 Standard diluent 1 瓶 1.5ml * 2-8℃
酶標試劑 HRP-Conjugate reagent 1 瓶 6 ml/3ml * 2-8℃
樣品稀釋液 Sample diluent 1 瓶 6 ml/3ml * 2-8℃
顯色劑 A 液 Chromogen Solution A 1 瓶 6 ml/3ml * 2-8℃
顯色劑 B 液 Chromogen Solution B 1 瓶 6 ml/3ml * 2-8℃
終止液 Stop Solution 1 瓶 6 ml/3ml * 2-8℃
濃縮洗滌液 wash solution 1 瓶 200ml *
說明書 Instruction 1份 *
封板膜 Closure plate membrane 2 片 *
密封袋 Sealed bags 1個 *

1.準備試劑,樣品和標準品

2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘

3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘

4.洗板5次,加入顯色液AB37℃顯色10分鐘

5.加入終止液

6.15分鐘之內讀OD

7.計算

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。

5. 培養細胞:檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),或組織蛋白萃取試劑用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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